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Este estudio evaluó la actividad antibacteriana de BioRoot RCS en comparación con la de los selladores Totalfill BC y AH Plus contra las biopelículas de Enterococcus faecalis en los túbulos dentinarios utilizando microscopía de barrido láser confocal. Se prepararon y esterilizaron 66 mitades de dentina radicular. Se utilizaron tres secciones para asegurar la esterilización. Los restantes fueron inoculados con E. faecalis.. Se examinaron tres muestras para verificar la viabilidad de las biopelículas. Las sesenta muestras se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos: AH Plus, BioRoot RCS, sellador Totalfill BC y sin sellador. Las muestras se incubaron durante 1, 7 y 30 días. Las muestras se tiñeron y se escanearon las cuatro esquinas de cada disco. El análisis estadístico se realizó mediante ANOVA de dos vías y la prueba post hoc de Tukey. Casi la mitad de las bacterias estaban muertas en el grupo BioRoot RCS el día 1 y en el grupo Totalfill BC el día 7. Todos los selladores mataron significativamente más bacterias que el control después de 30 días ( P ?<.05). El día 7, Totalfill BC mostró un porcentaje significativamente mayor de bacterias muertas que BioRoot RCS ( P?<0,05). El día 30, el grupo BioRoot RCS registró el mayor porcentaje de células muertas (61,75%), que fue significativamente más alto que los porcentajes de los grupos AH Plus y Totalfill BC ( p ?<0,05). Los selladores de conductos radiculares a base de silicato de calcio ejercieron efectos antimicrobianos contra las biopelículas de E. faecalis . La actividad antibacteriana de BioRoot RCS fue significativamente mayor que la de los selladores Totalfill BC y AH Plus después de 30 días de exposición.