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100	1		_aBritos, Maria Rosenda _912339
700	1		_aSin, Cynthya Solange _9188117
700	1		_aOrtega, Silvia Mercedes _97017
700	1		_aVasek, Olga Myriam _9188116
245	1	0	_aDiagnóstico molecular de Porphyomonas gingivalis: Optimización del método
264		1	_c2019
300			_a4 páginas
520			_aEl objetivo del presente trabajo fue estandarizar y optimizar la técnica de PCR convencional parta detección de Porphymonas gingivalis ATCC 33277. Materiales y métodos: Las cepa de P. gingivalis ATCC33227 se sembró en agar Bruella enriquecido con sangre de carnero, suplementado con hemiay vitamina K. El ADN se extrajo empleando el protocolo que emplea bromuro de cetil trimetilamonio (CTAB). Se evaluó la cantidad y calidad del material genético obtenido obtenido con el fotómetro UV Ampli-Quat, AQ-07 Nucleic Acid. Se realizó la PCR convencional con diferentes concentraciones de MgCl2 1 mM, 1,5 mM y 2.0mM y a dos temperaturas de alimento: 60°C y 55°C. Los productos PCR se separaron por electroforesis en un gel de agarosa 1% Las bandas se visualizaron en un fotodumentador. La sensibilidad se calculó teniendo en cuenta el número de bacterias en diferentes diluciones. Resultados: Se obtuvo una concentración 1,55x10 ng/ul de DNA genómico a partir de una suspensión bacteriana de 10 a la octava potencia, celulas bacterianas/ml, con íondice de pureza 1,648 (relación de OD2607OD280). Los mejores resultados se obtuvieron con una concentración de 2 mM de MgCl2 y una temperatura de alineación de 55°C. En cuanto a la sensibilidad se obtuvo un límite de detección de 5 x 10 / 5 µL células bacterianas en suspensión. Conclusión: En la prueba de PCR convencional para Porphymonas gingivalis ATCC 33277, las condiciones óptimas de estandarización son la concentración de 2 mM de MgCl y 55°C y es necesario una carga bacteriana mínima de 5 x 10 células/5 ul como límite de detección.
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773	0		_tRevista del Círculo Argentino de Odontología _x0325-7479 _gv. LXXV n. 225 (2017) _w257464
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