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100	1		_aGarcia Denegri, M. e. _9125702
700	1		_aRey, L. _9125703
700	1		_aLeiva, Laura C. _9125704
700	1		_aAcosta de Pérez, Ofelia C. _9125705
245	1	0	_aHistochemical analyses of muscle injury induced by venomfrom Argentine Bothrops alternatus víbora de la cruz / M.E. Garcia Denegri ... [et al.]
264		1	_c2007
300			_a5 páginas
520			_aAbstract: Histochemical methods were used to study necrosis of skeletal muscle fibers induced by Bothrops alternatus snake venom from Argentina. Rats with a body weight between 220.270 g, were used. Animals received an i.m. venom injection (800 µg) in the gastrocnemius. To determine creatinphosphokinase activity (CPK), blood samples were taken from the tail 60 min, 3, 6, 12 and 24 h after the envenoming. About 24 h later, rats received chloral hydrate anesthesia for histological analysis with Hematoxilin.Eosin (H.E) stain, and histochemical studies such as lipid peroxidation (Schiff¡¯s reaction), and calcium precipitation (alizarin red stain). Results showed an increment in plasma CPK level, with its major peak at 3 h. Histochemical analyses revealed an intense destruction of muscular fibers as a consequence of a ignificant lipid peroxidation and calcium precipitation as well. Histochemical methods can be considered as a valuable tool in applied research regarding toxicological problems such as snake venom intoxication. It can be concluded that B. alternatus snake venom leads to a lipid peroxidation accompanied by citoplasmatic calcium precipitation. In addition, it was demonstrated that H.E stain made on frozen cuts (histochemical technique) is effective to evidence a panoramic tissular view of muscular lesion caused by B. alternatus venom, with the advantage of demanding a shorter execution lapse (few hours) in relationship to classic H.E histological technique, which requires several days of procesing. Key words: Bothrops alternatus, muscle injury, histochemical analyses. Resumen : Se emplearon metodos histoquimicos para estudiar la necrosis de fibras musculares esqueleticas inducida por veneno de Bothrops alternatus de Argentina. Se utilizaron ratas con peso corporal de 220.270 g. Estos animales recibieron 800 µg de veneno via i.m. en el músculo grastrocnemio. Las muestras de sangre fueron tomadas de la cola a los 60 min, 3, 6, 12 y 24 horas luego del envenenamiento, para realizar determinaciones de creatinfosfoquinasa (CPK). Luego de 24 horas, las ratas recibieron anestesia con hidrato de cloral para realizar análisis histológicos con tinción Hematoxilina.Eosina (H.E) y también estudios histoquímicos tales como peroxidación de lípidos (reaccion de Schiff) y precipitacion de calcio (tincion rojo de alizarina). Los resultados mostraron un incremento de los niveles de CPK, cuyo acme se registro a las 3 horas post envenenamiento. Las pruebas revelaron una intensa destrucción de fibras musculares como consecuencia de una significativa peroxidación de lípidos y también por precipitacion de calcio. Se concluye que el veneno de B. alternatus conduce a peroxidación de lipidos acompanada de precipitación citoplasmatica de calcio. Además, se demuestra que la tinción H.E efectuada en cortes por congelación (técnica histoquímica) es eficaz para evidenciar una vista tisular panorámica de los cambios musculares causados por el veneno de B. alternatus, con la ventaja de exigir un lapso de ejecución mas corto (pocas horas), con relación al método H.E clásico (técnica histológica), la cual exige varios dias de procesamiento.
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